엽록소는 고등 식물과 다른 모든 광합성 유기체에서 발견되는 녹색 색소입니다. 엽록소 A와 엽록소 B는 에탄올, 에테르 및 아세톤 및 기타 용매에 용해되고 물 및 석유 에테르에는 용해되지 않으므로 아세톤, 메탄올, 에탄올, 에틸 아세테이트 등과 같은 극성 용매를 사용하여 엽록소를 추출할 수 있습니다.
엽록소 추출 과정:
엽록소 추출은 섭씨 25도의 반암실에서 준비합니다. 추출 단계는 다음과 같습니다.
(1) 생잎 1000g을 취하여 웩슬러에 빻는다.
(2) 빻은 녹색잎 1000g을 아세톤에 소량의 탄산칼슘(온도 20도)과 함께 넣어 여과하고 세척한 후 잎 조각이 무색이 될 때까지 추출한다.
(3) 여과한 아세톤 추출물을 석유에테르 1리터와 아세톤 100mL가 든 깔때기에 넣고 증류수를 가하여 성층될 때까지 천천히 돌린다. 수층에 있는 대부분의 아세톤과 수용성 불순물은 버려지고 석유 에테르 용액만 남게 됩니다.
(4) 석유에테르 용액을 다시 증류수로 정제한 후 석유에테르와 옥살산 0.01g을 함유한 2080% 메탄올 용액 2{4}}로 5회 이상 세척하여 황록색 현탁액을 얻는다. .
(5) 무수황산나트륨으로 현탁액을 건조시키고 두께 3cm의 자당분말로 만든 칼럼에 침윤시킨다. 그런 다음 침전된 안료를 청소하여 카로티노이드를 제거하고 천연 엽록소만 포함하도록 합니다.
(6) 천연 엽록소를 함유한 자당 컬럼은 두 개의 층으로 나뉘며, 녹색 층에는 4-10mm 엽록소 B층이 있고 다른 파란색 층은 2-6mm 엽록소 A층이 있습니다.
(7) 청색층의 중간 부분(청색층의 약 절반)을 에테르에 넣고 현탁액을 여과 추출하고 증류수로 세척하고 황산나트륨으로 건조시키고 기구로 여과하여 엽록소를 얻는다. ㅏ.
(8) (6)에서 녹색층의 중간 부분을 제거하고 재빨리 여과 및 세척용 에테르에 넣어 엽록소 B 에테르 용액으로 한다.
추출하는 동안 어떻게 분리합니까?
크로마토그래피는 유기 화합물의 분리, 정제 및 식별을 위한 중요한 방법이며, 특히 미세 분석에서 널리 사용됩니다. 과일과 채소의 색소는 주로 지용성 카로틴, 루테인, 엽록소 및 수용성 안토시아닌을 포함합니다. 추출 실험에서 우리는 유사한 혼화성 수용성 안토시아닌 여과의 원리를 사용할 수 있으며, 이는 차례로 박층 크로마토그래피, 컬럼 크로마토그래피, 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC)를 사용하여 베타카로틴, 루테인을 분리할 수 있습니다. 3가지 안료의 극성으로 인해 약화된 엽록소는 단일 유기 용매 또는 팽창제 및 용리제로 혼합 용매의 다른 비율을 적절하게 선택할 수 있으며 최적의 분리 조건을 결정했습니다.
